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〈Originals〉Purification and partial characterization of laccase from the soft-rot fungus Graphium sp. M-1-9a
https://kindai.repo.nii.ac.jp/records/19191
https://kindai.repo.nii.ac.jp/records/19191f6bf6949-fed1-4c95-abf4-7bc2406db9d1
| 名前 / ファイル | ライセンス | アクション |
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AN00064044-20180331-0035.pdf (460.1 kB)
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| Item type | ☆紀要論文 / Departmental Bulletin Paper(1) | |||||||||||||||||||||
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| 公開日 | 2018-03-08 | |||||||||||||||||||||
| タイトル | ||||||||||||||||||||||
| タイトル | 〈Originals〉Purification and partial characterization of laccase from the soft-rot fungus Graphium sp. M-1-9a | |||||||||||||||||||||
| 言語 | en | |||||||||||||||||||||
| その他（別言語等）のタイトル | ||||||||||||||||||||||
| その他のタイトル | 〈原著〉軟腐朽を起こすGraphium sp. M-1-9のラッカーゼの諸性質について | |||||||||||||||||||||
| 著者 |
田中, 裕美
× 田中, 裕美
× 山本, 貴義
× 本田, 克樹
× 板倉, 修司
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| 言語 | ||||||||||||||||||||||
| 言語 | eng | |||||||||||||||||||||
| キーワード | ||||||||||||||||||||||
| 主題 | soft-rot fungus, laccase, Graphium sp., wood degradation | |||||||||||||||||||||
| 資源タイプ | ||||||||||||||||||||||
| 資源タイプ識別子 | http://purl.org/coar/resource_type/c_6501 | |||||||||||||||||||||
| 資源タイプ | departmental bulletin paper | |||||||||||||||||||||
| 著者(英) | ||||||||||||||||||||||
| 言語 | en | |||||||||||||||||||||
| 値 | TANAKA,Hiromi | |||||||||||||||||||||
| 著者(英) | ||||||||||||||||||||||
| 言語 | en | |||||||||||||||||||||
| 値 | YAMAMOTO,Takanori | |||||||||||||||||||||
| 著者(英) | ||||||||||||||||||||||
| 言語 | en | |||||||||||||||||||||
| 値 | Honda,Katsuki | |||||||||||||||||||||
| 著者(英) | ||||||||||||||||||||||
| 言語 | en | |||||||||||||||||||||
| 値 | ITAKURA,Shuji | |||||||||||||||||||||
| 著者 所属 | ||||||||||||||||||||||
| 値 | 近畿大学農学部; 名誉教授 | |||||||||||||||||||||
| 著者 所属 | ||||||||||||||||||||||
| 値 | 近畿大学大学院農学研究科応用生命化学専攻 | |||||||||||||||||||||
| 著者 所属 | ||||||||||||||||||||||
| 値 | 近畿大学大学院農学研究科応用生命化学専攻 | |||||||||||||||||||||
| 著者 所属 | ||||||||||||||||||||||
| 値 | 近畿大学大学院農学研究科応用生命化学専攻 | |||||||||||||||||||||
| 著者所属(翻訳) | ||||||||||||||||||||||
| 値 | Kindai University | |||||||||||||||||||||
| 著者所属(翻訳) | ||||||||||||||||||||||
| 値 | Kindai University | |||||||||||||||||||||
| 著者所属(翻訳) | ||||||||||||||||||||||
| 値 | Kindai University | |||||||||||||||||||||
| 著者所属(翻訳) | ||||||||||||||||||||||
| 値 | Kindai University | |||||||||||||||||||||
| 版 | ||||||||||||||||||||||
| 出版タイプ | NA | |||||||||||||||||||||
| 出版タイプResource | http://purl.org/coar/version/c_be7fb7dd8ff6fe43 | |||||||||||||||||||||
| 出版者 名前 | ||||||||||||||||||||||
| 出版者 | 近畿大学農学部 | |||||||||||||||||||||
| 書誌情報 |
近畿大学農学部紀要 en : MEMOIRS OF THE FACULTY OF AGRICULTURE OF KINDAI UNIVERSITY 号 51, p. 35-50, 発行日 2018-03-31 |
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| ISSN | ||||||||||||||||||||||
| 収録物識別子タイプ | ISSN | |||||||||||||||||||||
| 収録物識別子 | 21896267 | |||||||||||||||||||||
| 抄録 | ||||||||||||||||||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||||||||||||||||||
| 内容記述 | [Synopsis]An extracellular laccase was isolated, purified, and partially characterized from the culture medium of Grphium sp. M-1-9, which causes soft rot in Japanese beech wood. Laccase producted by this fungus in cultures supplemented with copper sulfate was purified 60-fold by ammonium-sulfate precipitation, Sephadex G-100 gel-filtration chromatography, DEAE Sepharose ion-exchange chromatography, and Superdex G-75 gel-filtration chromatograpgy, with a yield of 3.3%. Native and SDS-PAGE showed an active band with a molecular mass of approximately 67,000. Purified laccase maintained 70-80% stability at pH 6-10 for 180 min and at 30-40°C for 120 min. The optimum pH for the oxidation of 2,2´-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) was pH 3, while that for the oxidation of 2,6-dimethoxyphenol (DMP), guaiacol, and syringaldazine was pH 6. Kinetic constants (Km and kcat/km) showed that 2,6-DMP and syringaldazine were more effective substrates than ABTS and guaiacol. Enzyme activity was completely inhibited by sodium azide or L-cysteine at a concerntration of 1 mM. Laccase activity was also inhibited by 5 mM SDS.\ [要約]ブナ材に軟腐朽を起こすGraphiumsp. M-1-9を、硫酸銅を添加したブナ木片培地で培養し、ラッカーゼを分離・精製し、その諸性質を検討した。硫安沈殿、ゲルロ過クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィーにより60倍に精製されたラッカーゼの収量は3.3％であった。SDS-PAGEにより、分子量は約67000であった。精製したラッカーゼはpH 6-10では180分間、また30-40℃では120分間、70-80％の活性を維持した。最適pHは基質により異なっており、2,2ʹ-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS)ではpH 3、2,6-dimethoxyphenol(DMP)、guaiacol,、syringaldazineではpH 6であった。Kmとkcat/Kmより2,6-DMP とsyringaldazineは、ABTS とguaiacolより効率的な基質であった。酵素活性は1 mM.のアジ化ナトリウムあるいはL-システイン、5 mM SDSで阻害された。 |
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| フォーマット | ||||||||||||||||||||||
| 内容記述タイプ | Other | |||||||||||||||||||||
| 内容記述 | application/pdf | |||||||||||||||||||||
