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  1. Public
  2. 研究紀要
  3. 農学部紀要
  4. 16(1983)
  1. Private
  2. 研究紀要
  3. 農学部紀要Memoirs of the Faculty of Agriculture of Kinki University
  4. 16(1983)

タバコモザイクウィルスに対する植物培養細胞の抵抗性発現機作(第1報) : タバコ細胞のカルス誘導,プロトプラスト化およびクローニングに関する条件

https://kindai.repo.nii.ac.jp/records/5058
https://kindai.repo.nii.ac.jp/records/5058
1d99f43a-61cb-4f06-9a7b-86a4ebf311d5
名前 / ファイル ライセンス アクション
AN00064044-19830315-0031.pdf AN00064044-19830315-0031.pdf (1.1 MB)
アイテムタイプ ☆紀要論文 / Departmental Bulletin Paper(1)
公開日 2008-01-28
タイトル
タイトル タバコモザイクウィルスに対する植物培養細胞の抵抗性発現機作(第1報) : タバコ細胞のカルス誘導,プロトプラスト化およびクローニングに関する条件
タイトル
タイトル Resistance Mechanism of Cultured Plant Cells to Tobacco Mosaic Virus (I) : Conditions for Callus-induction, Protoplast Preparation and Single Cell Cloning of Tobacco, Nicotiana glutinosa
言語 en
著者 豊田, 秀吉

× 豊田, 秀吉

豊田, 秀吉

ja-Kana トヨダ, ヒデヨシ

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反保, 宏行

× 反保, 宏行

反保, 宏行

ja-Kana タンポ, ヒロユキ

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国田, 経仁

× 国田, 経仁

国田, 経仁

ja-Kana クニタ, ツネヒト

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平井, 篤蔵

× 平井, 篤蔵

平井, 篤蔵

ja-Kana ヒライ, トクゾウ

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言語
言語 jpn
資源タイプ
資源タイプ識別子 http://purl.org/coar/resource_type/c_6501
資源タイプ departmental bulletin paper
著者(英)
言語 en
値 Toyoda, Hideyoshi
著者(英)
言語 en
値 Tanpo, Hiroyuki
著者(英)
言語 en
値 Kunita, Tsunehito
著者(英)
言語 en
値 Hirai, Tokuzo
著者 所属
値 近畿大学農学部農学科植物病理学研究室
著者 所属
値 近畿大学農学部農学科植物病理学研究室
著者 所属
値 近畿大学農学部農学科植物病理学研究室
著者 所属
値 近畿大学農学部農学科植物病理学研究室
著者所属(翻訳)
値 Laboratory of Plant Pathology, Department of Agriculture, Faculty of Agriculture, Kinki University
著者所属(翻訳)
値 Laboratory of Plant Pathology, Department of Agriculture, Faculty of Agriculture, Kinki University
著者所属(翻訳)
値 Laboratory of Plant Pathology, Department of Agriculture, Faculty of Agriculture, Kinki University
著者所属(翻訳)
値 Laboratory of Plant Pathology, Department of Agriculture, Faculty of Agriculture, Kinki University
版
出版タイプ NA
出版タイプResource http://purl.org/coar/version/c_be7fb7dd8ff6fe43
出版者 名前
出版者 近畿大学農学部
書誌情報 近畿大学農学部紀要
en : Memoirs of the Faculty of Agriculture of Kinki University

号 16, p. 31-40, 発行日 1983-01-01
ISSN
収録物識別子タイプ ISSN
収録物識別子 04538889
抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 [Author abstract]Calture conditions for the callus of tobacco plant, Nicotiana glutinosa, were examined. Callus induction and growth were the highest in MS-agar medium supplemented with 2.0 μg/ml 2,4-D・Na and 0.2 μg/ml kinetin or MS-liquid medium with 0.5 μg/ml 2,4-D・Na and 0.05 μg/ml kinetin, respectively. Shaking incubation of callus induced on MS-agar medium presented friable callus tissues which were easily separated to cell clumps of various size. Speedy release of protoplast from callus tissue was observed in the treatment of enzyme solution to which pectolyase was added. On the other hand, the highest yield of protoplasts was observed in the prolonged treatment with Cellulase Onozuka R-10. The effect of the enzyme was increased when free single cells were treated. Successful cloning of colonies, which were originated from single cells and formed one month after incubation, was conducted by selecting separately and subculturirig for 14-15 passages.[著者抄録]タバコ(Nicotiana glutinosa)のカルス誘導とその遊離細胞のクローニングおよびプロトプラス化に好適な培養条件について検討した。表面殺菌種子を,各種濃度の2,4-Dのナトリウム塩とカイネチンを添加したMurashige-Skoog(MS)寒天培地で培養し,種子発芽後に認められるカルス誘導を調べた。その結果,2.0μg/mlの2,4-D・Naと0.2μg/mlのカイネチンおよび3.0μg/mlの2,4-D・Naと0.1μg/mlのカイネチン添加区でもっとも高いカルス誘導の値が得られた。これらのカルスには,形態的特徴や増殖速度を異にするカルス組織が含まれているため,MS液体培地で振とう培養した。この場合,添加する2,4-D・Naとカイネチンの濃度は,それぞれ0.5μg/mlと0.05μg/mlがその増殖に最適であった。数回の継代培養によって,カルス組織から容易に単細胞を遊離しうるカルスを得た。上記カルスからプロトプラストを調製するための酵素条件を検討した。細胞壁分解酵素にはセルラーゼオノヅカRS 10 mg/ml, マセロザイム2 mg/mlおよびペクトリアーゼ1 mg/mlを組合せて用いた場合に迅速かつ高頻度のプロトプラスト化が認められたが,処理時間を延せばセルラーゼオノヅカR-10を単独で使用しても高い値が得られた。カルスをその大きさによって分類し,それぞれからプロトプラストの出現する率を調べたところ,直径が2000~4000μmのカルスでもっとも高い値が得られた。単一細胞に出来したカルスをクローニングするため,250μmのメッシュを通過しうるカルス細胞を得た。この細胞集団の90%以上が単一細胞であったので,50°Cで溶解したMS寒天培地に細胞液(細胞密度:5×10^5 cell/ml)を加え,ペトリ皿で培養した。培養1ケ月後に形成されたカルス塊を単離し,13~15回継代したのち,cell line として命名した。
サムネイル

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フォーマット
内容記述タイプ Other
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