@article{oai:kindai.repo.nii.ac.jp:00015016,
 author = {森田,  資隆},
 issue = {2},
 journal = {かやのもり：近畿大学産業理工学部研究報告, Reports of Faculty of Humanity-Oriented Science and Engineering, Kinki University},
 month = {May},
 note = {Pl9胚性癌腫細胞(PI9)は、マウス精巣に生じた奇形癌腫を株化したもので、幹細胞としての性質を持つ細胞株である。本研究では、コンビナトリアル・バイオエンジニアリングの手法の一つであるファージディスプレイ法により、未分化状態のP19を認識して結合するペプチドのスクリーニングを行い、幹細胞マーカーとなる分子の探索を行った。未分化状態のPl9をレチノイン酸を加えた培養液中で4日間浮遊培養し、神経細胞への分化誘導を行った。そして、直鎖12残基のペプチドを提示するファージペプチドライブラリーを神経細胞と混合し、これに結合しないファージを回収して未分化状態のPl9と結合し、これに結合するペプチドを単離した。スクリーニングによって得られたファージのPl9への結合の確認は、蛍光修飾された抗ファージ抗体を用いた蛍光イムノアッセイにより行った。スクリーニング後、ファージの提示するペプチドの配列には収束の傾向が見られた。このファージを単離して蛍光イムノアッセイを行ったところ、未分化状態のPl9に選択的に結合していることが示唆された。P 19 cell is a pluripotent stem cell of murine teratocarcinoma. When treated with retinoic acid, P 19 cells can be differentiated along a neural cell lineage in culture. To isolate peptides that bind to the stem cell, we employed a phage display technology with undifferentiated P 19 cells as the target. In order to r-educe non-specific binding of phages to the cell surface, the phage libraries were pre- adsorbed to the differentiated P 19 cells before each selection on the undifferentiated P 19 cells. After eight rounds of the selection、 No.28 phage displaying AしPST SSQMPQL-peptide was isolated. lmmunofluorescence analysis revealed that No.28 phage selectively binds to the undifferentiated P 19 cells, but not to the differentiated P 19 cells or SHSY cell line. The chemically synthesized peptide ALPST SSQMPQL presented on the No.28 phage efficiently inhibited the binding of No.28 phage to the undifferentiated P 19 cells. This result confirmed that No.28 phage binding to the cell was mediated by the displayed peptide. The identified peptide may be targeted to a marker expressed on the stem cell, and thus become a practical tool for the isolation of somatic stem cells., application/pdf},
 pages = {1--6},
 title = {ファージディスプレイ法によるP19胚性癌腫細胞認識},
 volume = {5},
 year = {2006},
 yomi = {モリタ, ヤスタカ}
}